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今天小編給大家講講高效液相色譜柱峰形拖尾的9個原因：1.色譜柱物理損壞色譜柱有物理損壞是造成峰形拖尾的根源，解決方法就是更換新柱。2.色譜柱內填料污染流動相和樣品中的雜質是色譜柱主要污染源。流動相所用的各種溶劑至少是分析純，盡量使用色譜純試劑。流動相所用的水要是超純水或全玻璃器皿雙蒸水。用前先用0.45um溶劑微孔過濾(器)過濾，除去可能存在的微粒。流動相建議現用現配，對于含鹽的溶液尤其注意長置會產生細菌或出現沉淀。此外還得保證儲存流動相的容器清潔。復雜樣品可選用0.45um...

高效液相色譜柱是由柱管、壓帽、卡套(密封環)、篩板(濾片)、接頭、螺絲等組成。柱管的材質有很多，比如聚合物、玻璃、不銹鋼等。但是建議柱管用不銹鋼材質，因為不銹鋼這種金屬耐高壓、耐腐蝕且硬度高，相比于玻璃等材質不易摔壞。不過當壓力不高于70Kg/cm2時，也可采用厚壁玻璃或石英管。對于色譜柱柱管內壁要求有很高的光潔度，不銹鋼柱內壁會經過多次拋光，這是為提高柱效，減小管壁效應。0.1μm高光潔度色譜柱柱管能夠快速分析的同時保持超高的柱效;使用壽命長，不僅能夠減少頻繁更換色譜柱帶來...

高效液相色譜柱是色譜分離的核心。一支合適，穩定，高效的色譜柱對建立普適性強，重現性好的方法是不可少的。因色譜柱是消耗品，隨著使用時間或進樣次數的增加，會出現色譜峰高降低，峰寬加大或出現肩峰的現象，一般來說是柱效的下降。此時需要對色譜柱進行再生：(1)反相柱的再生，采用以甲醇:水=90:10(V/V),純甲醇，異丙醇，二氯甲烷等溶劑作流動相，順次沖洗，每種流動相流經色譜柱的量為20~30倍色譜柱體積然后再以相反順序沖洗色譜柱。(2)正相柱再生。順次以正己烷、異丙醇、二氯甲烷、甲...

高效液相色譜柱性能影響因素有很多，例如，硅膠純度、色譜柱尺寸、顆粒形狀、粒徑、表面積、孔徑，化學性質包括鍵合類型、碳覆蓋率、封端，在選擇高效液相色譜柱之前，先多了解自己的樣品和雜質，他們的類型結構、極性、酸堿性、分子量大小等等。1.樣品是極性的且弱酸性的;就可以選擇C18在100%酸性水溶液條件下檢測，即要選擇承受100%純水且對極性化合物保留很好的色譜柱。2.如果樣品極性太強，或酸性太強;可以選擇CN，NH2，或硅膠柱，HILIC(親水色譜)，也有使用C18+強陰離子對試劑...

高效液相色譜柱的鍵合基質分為硅膠基質、聚合物基質等，其中硅膠基質應用較為廣泛，其特點主要包括以下3方面：(1)低pH值，硅膠鍵合鍵容易水解(pH8)。(2)在接近中性的條件時，硅醇基裸露，顯酸性，不適宜分離堿性化合物。(3)某些硅膠被一定金屬污染，這些金屬會引起峰的不對稱或拖尾，甚至化合物的死吸附。高效液相色譜柱的硅膠基質可分為全多孔硅膠微粒、雜化硅膠顆粒和實心核硅膠顆粒。1、全多孔硅膠基質：全多孔硅膠，以其全多孔的結構特點具有很高的比表面積，故具有很高的柱效。其機械強度大的...

反相色譜是迄今在高效液相色譜中應用*泛的技術，主要是因為它適用于分析絕大多數的非極性物質和很多的可離子化的及離子化合物。如果污染是因為重復進樣時強保留物質的累積引起的，利用簡單的清洗步驟來除去這些污染物往往就能恢復其色譜性能。經過等度運行后的高效液相色譜柱，有時用90～100%含量的溶劑B(雙溶劑反相系統中洗脫能力較強的溶劑，如甲醇、乙晴、四氫呋喃等)沖洗20個柱體積可以清除污染物(色譜柱的柱體積和空柱管體積概念不同，一根4.6x250mm柱子的柱體積只有2.5ml，2.1x...

液相色譜柱是液相色譜分離能力的核心部分，其化學性質參數包括以下幾個方面：1、硅膠基質硅膠基質是通用的基質，強度大，化學修飾容易，但使用的pH值范圍有限(一般為2—8，特殊修飾的可以達到1—12)。2、聚合物基質聚合物基質多為聚苯乙烯—二乙烯基苯或聚甲基丙烯酸脂，化學穩定，應用pH范圍寬，具有更強的疏水性，對蛋白質等樣品分離效果較好;但強度較小，有機溶劑可能導致聚合物溶脹而受損，批次重復性較差，商品化色譜柱不多，一般價格較貴。3、載碳量載碳量是基質表面鍵合相的比例，載碳量高，則...